Растворимая межклеточная молекула адгезии (sICAM-1): диагностическое значение в офтальмологической практике

Максимов В.Ю., Дмитриева О.Г., Максимов М.В. Soluble intercellular adhesive molecule, it’s role in diagnostics in ophthalmology V.Yu. Maximov, O.T. Dmitrieva, M.V. Maximov GUZ Regional ophthalmologic Hospital, Saratov sICAM-1 concentration, reflecting activation of endothelial cells and systemic inflammatory reaction, is significantly raised in the blood serum in some ophthalmologic diseases. In this study efficacy of laboratory test for detection of sICAM-1 in the blood serum for postoperative iridocyclitis prediction in patients with intraocular aphakia correction was evaluated. It was revealed that it’s possible to predict postoperative inflammatory process with high reliability in patients who had higher level of sICAM-1 before operation. Концентрация sICAM-1, отражающая активацию клеток эндотелия и системную воспалительную реакцию, значительно возрастает в сыворотке крови при некоторых офтальмологических заболеваниях. Повышенное содержание sICAM-1 отмечается при интермедиарных увеитах. Увеиты различной этиологии характеризуются разной степенью повышения sICAM-1 (Klok A.M. et al., 1999). Uchio E. с соавт. (1999) рекомендуют определение sICAM-1 в качестве оценочного критерия тяжести воспалительного процесса при различных формах аутоиммунных увеитов. Повышение содержания sICAM-1 в сыворотке крови и непосредственно в стекловидном теле у больных с увеитами является плохим прогностическим фактором в отношении эффективности терапии и возможной отслойки сетчатки (Webster L. et al., 1998). Zaman A.G. с соавт. (1994) использовали тест sICAM в качестве маркера течения и прогноза идиопатических увеоретинитов. Обращала на себя внимание высокая степень достоверности полученных автором результатов - (p = 0,00003). Таким образом, тест определения сывороточной sICAM-1 при различной офтальмологической патологии, по данным большинства авторов, является высокочувствительным и информативным в плане оценки течения заболевания и его прогноза. Тем не менее в литературе практически отсутствуют сведения об эффективности применения данного метода для прогноза постоперационных воспалительных реакций у больных с интраокулярной коррекцией афакии. Цель: Оценить эффективность применения лабораторного теста определения sICAM-1 в сыворотке крови для прогноза постоперационных иридоциклитов у больных с интраокулярной коррекцией афакии. Материалы и методы: Под наблюдением находились 68 пациентов после экстракции катаракты с имплантацией ИОЛ фирмы U.S.Optics, которые были разделены на две группы: А (34 человека) - с неосложненным течением раннего послеоперационного периода и Б (34 человека) - с наличием экссудативных реакций II-III степени в раннем послеоперационном периоде. Средний возраст больных составил 62 года, (мужчин и 30, 38 женщин) . В этих группах было проведено сравнительное исследование маркера воспаления sICAM до и после (вторые сутки) операции. Концентрацию sICAM-1 в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом с помощью коммерческого набора («Bedneer Med System», Австрия). Образцы сыворотки разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и помещали в лунки микропланшета, покрытые мышиными моноклональными антителами против человеческой sICAM-1. Затем добавляли конъюгат и инкубировали исследуемые пробы в течение 2 часов при комнатной температуре. После этого лунки тщательно промывали и на 10 минут вносили субстрат для развития ферментативной реакции. Останавливали реакцию с помощью 4 N серной кислоты. Оптическую плотность образцов определяли на спектрофотометре при длине волны 450 мм. Используя калибровочную кривую, рассчитывали количество sICAM-1 в 1 мл сыворотки (нг/мл). Результаты: У больных с неосложненным послеоперационном периодом (группа А) содержание sICAM в сыворотке до операции составило 252, 28±20,77 ng/ml, что статистически достоверно не отличалось от значений, полученных при обследовании здоровых лиц. На вторые сутки после операции наблюдалось незначительное повышение уровня sICAM в сыворотке крови (289,41± 18,17) как, по сравнению со значениями, зарегистрированными до операции (на 14%), так и обнаруженными у здоровых лиц (35%). Однако указанные сдвиги не имели статистической достоверности. У больных с осложненным послеоперационным периодом (группа Б) уровень сывороточной sICAM был 427,29 ± 32,31, что достоверно выше контрольных цифр здоровых лиц до операции (на 100%) и после (на 179%). В этой же группе больных увеличение содержания sICAM (595,64 ± 35,84) на вторые сутки после операции (по сравнению со значениями до операции) составляло 40% и было статистически значимо (табл. 1). Выводы: 1.При регистрации у больных до операции содержания sICAM в пределах доверительного интервала контрольных значений (у здоровых лиц) с высокой степенью достоверности можно прогнозировать течение послеоперационного периода без осложнений. Повышенные цифры sICAM могут означать (р<0,05) высокий риск развития послеоперационного воспалительного процесса. 2. Лабораторный тест определения sICAM-1 в сыворотке крови можно рекомендовать в качестве высокочувствительного и высокоинформативного метода оценки и прогноза воспалительных осложнений у пациентов с интраокулярной коррекции афакией. Морфологическая картина жидких сред глаза и аминокислотный спектр сыворотки крови в патофизиологии факоморфической и факолитической глаукомы А.А. Девяткин, С.Н. Шатохина, Б.Ф. Черкунов, И.В. Малов, В.Н. Шабалин, В.М. Малов, Е.Б. Ерошевская 153 Morphologic picture of eye liquid medium and aminoacid spectrum of blood serum in pathophysiology of phacomorphous and phacolytic glaucoma A.A. Devyatkin, S.N. Shatohina, B.F. Cherkunov, I.V. Malov, V.N. Shabalin, V.M. Malov, E.B. Eroshevskaya Russian Scientific Research Institute of Gerontology of Ministry of health and social development of Russia, Samara State Medical University Purpose: Present work was devoted to development of theoretic statements of pathogenesis of phakomorphous and phakolytic glaucoma based on the comparison of morphologic picture of eye liquid medium, mechanisms of glutamate neurotoxicity and role of guanilatcyclase messenger system components. Objective: 64 patients were divided into 2 groups. 1 group (main) included 43 patients at the age of 56-73 years, in 39 patients phakomorphous glaucoma was diagnosed and in 4- phakolytic glaucoma. 2 group (control) included 21 patients with immature senile cataract with no signs of swelling. Lacrimal fluid, aqueous humor and lens fluid were taken as material for morphologic examination with the help of method of wedge-shaped dehydratation by Shabalin V.N.-Shatohina S.N. Aminoacid spectrum of blood serum in examinated patients was studied with micromethod of chromatography on paper. Results: It was found that morphologic picture of eye liquid medium reflects molecular processes which exist in phakomorphous and phakolytic glaucoma. Pathologic crystal structures, argumentative of acute and deep methabolic disorders in eye, which characterize pathophysiologic mechanisms of their development were detected. The leading place is given to increase of synthesis of one of the main representative of guanilatcyclase messenger system- nitric oxide. These changes begin stabilizing in 3 days from surgery and don’t have statistically significant differences with analogous indices in control group by 10 day of postoperative period. Surgical treatment of phakomorphous and phakolytic glaucoma is pathogenically directed to normalization of glutamate synthesis and stabilization of biosynthesis of main components of glutamatcyclase messenger system. Осложнением прогрессирующей катаракты может быть резкое повышение внутриглазного давления. Вторичная глаукома может развиться при бурном оводнении хрусталика в незрелую (фаза первичного набухания - факоморфическая глаукома и перезрелую фаза вторичного набухания - факолитическая глаукома) стадию старческой катаракты. В эти периоды заболевания хрусталик значительно увеличивается в объеме, за счет аккумуляции в себе водянистой влаги, блокирует угол передней камеры, вызывая повышение внутриглазного давления. Развивается типичная картина острого приступа закрытоугольной глаукомы [4]. В настоящее время в литературе имеются сообщения о ведущей роли метаболических факторов, приводящих к развитию патофизиологических процессов в глазу при первичной открытоугольной глаукоме [1, 6]. Ведущая роль в нейротоксическом повреждении ганглиозных клеток сетчатки и снижении зрительных функций, по мнению исследователей, принадлежит глутаминовой кислоте и нитросоединению - оксиду азота [1, 8, 9, 10]. Оксид азота является действующим компонентом эндотелиального фактора EDRF (Endothelium derived relaxation factor), который входит в состав активаторов растворимой формы гуанилатциклазы - одного из ключевых ферментов гуанилатциклазной мессенджерной системы. Роль оксида азота в этой системе заключается в том, что при взаимодействии с гемом гуанилатциклазы молекула нитрорадикала способствует быстрому образованию вторичного мессенджера - циклического гуанозинмонофосфата, большинство эффектов которого опосредовано через ц-ГМФ-зависимую протеинкиназу, именуемую протеинкиназой G [2]. Кроме того, получены данные, свидетельствующие об участии различных видов физико-химических взаимодействий биологических жидкостей в патогенезе как первичной открытоугольной глаукомы, так и развитии набухающей катаракты в процессе инволютивного катарактогенеза [3, 7]. Из приведенных выше данных видно, что имеющиеся на сегодняшний день работы, относятся в основном к вопросам глутаматовой нейротоксичности, повреждающему действию высоких концентраций оксида азота и участию биологических жидкостей в патогенезе первичной открытоугольной глаукомы. Подобных исследований, посвященных проблеме патогенетических механизмов развития факоморфической и факолитической глаукомы, в доступной нам литературе не встретились. Учитывая это, целью настоящей работы явилась разработка теоретических положений патогенеза факоморфической и факолитической глаукомы на основе сопоставления морфологической картины жидких сред глаза, механизмов глутаматовой нейротоксичности и роли компонентов гуанилатциклазной мессенджерной системы. Объект, материал и методы. Объектом исследования явились 64 пациента, которые были разделены на 2 группы. 1 группа (основная) - 43 больных в возрасте от 56 до 73 лет: у 39 пациентов была диагностирована факоморфическая глаукома, у 4 - факолитическая. 2 группу (контрольная) составил 21 больной незрелой старческой катарактой, не имеющий клинических признаков набухания хрусталика. Всем пациентам было проведено общеклиническое и офтальмологическое обследование, выполнена факоэмульсификация катаракты с имплантацией эластичных интраокулярных линз Acrisof. Материалом для морфологического исследования служила слезная жидкость, водянистая влага и хрусталиковая жидкость. Для проведения морфологического исследования производили забор слезной жидкости у больных основной группы трижды: при поступлении, на 3-й и 10-й день после операции. Водянистую влагу получали в момент операции (перед заполнением передней камеры вискоэластиками) у пациентов через парацентез роговицы в прозрачной части лимба инсулиновым шприцом. Используя современные хирургические приемы, удается получить аккумулированную хрусталиком водянистую влагу (хрусталиковую жидкость для проведения ее лабораторного исследования). Для ее взятия у больных основной группы выполняли прокол иглой инсулинового шприца передней капсулы хрусталика и делали забор хрусталиковой жидкости. Морфологическая картина жидких сред глаза изучена методом клиновидной дегидратации по В.Н. Шабалину - С.Н. Шатохиной [7]. Аминокислотный спектр сыворотки крови у обследованного контингента больных исследован нами микрометодом при помощи хроматографии на бумаге [5]. Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась на персональном компьютере в программе «Microsoft Excel» при использовании методов вариационной статистики с выявлением